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診斷嬰幼兒腸套疊有典型癥狀者一般診斷不困難。臨床上有陣發性腹痛、嘔吐、便血及腫塊四者存在即可確診。對只有陣發性腹痛和嘔吐的腸套疊早期，尚未出現血便，或晚期由于腹脹明顯觸不清腫塊的病例，應做直腸指檢，并進行空氣或鋇劑灌腸X線檢查，可及時作出正確診斷。
結腸注氣或鋇劑X線檢查是一種簡便安全而可靠的診斷方法，不但可以及時作出正確診斷，同時也是較好的治療措施。鑒別診斷小兒腸套疊應與其他許多胃腸道疾病相鑒別。
一、細菌性痢疾亦多見于嬰幼兒，起病急，有陣發性腹痛、血便等，可能與腸套疊混淆。但痢疾排便次數多，含有大量粘液和膿血便，有里急后重，早期即有發熱，腹痛不如 腸套疊劇烈而有規律，腹部也觸不到腫塊。糞便檢查可見大量膿細胞，培養有痢疾桿菌生長。鑒別常無困難，但值得注意的是，在細菌性痢疾的基礎上，因腸蠕動紊亂，也可并發腸套疊。
二、急性壞死性腸炎可表現為腹痛、嘔吐和血便，但該病多有腹瀉史，早期即可表現為腹脹、高熱和頻吐，大便頻繁，呈洗肉水樣，量較多，具有特殊腥臭味，全身情況惡化快，常表現嚴重脫水、皮膚花紋等休克癥狀。
三、蛔蟲性腸梗阻多見于較大兒童，可有陣發性腹痛、嘔吐，在腹部可觸及蛔蟲團，頗似臘腸樣腫塊，但其表面常呈條索狀，一般無血便。發病不如腸套疊急驟，多有排蛔蟲或不當驅蟲史。
四、過敏性紫癜多見于年長兒，多數有新鮮的出血性皮疹，伴有關節痛，有時伴有血尿。血便多呈暗紅色，腹部觸不到腫塊，這些癥狀有助于與腸套疊鑒別，有時本病可并發腸套疊，應引起注意，必要時應作X線檢查。